本文作者：刘晓旭、侯志广、吴敬慧、王 雪、逯忠斌                                    单位： 吉林农业大学资源与环境学院

嘧菌酯（azoxystrobin）是先正达公司发现并第一个商品化的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，是一种仿生合成的甲氧基丙烯酸酯类广谱杀菌剂[1-2]，具有高效、广谱、保护、治疗、铲除、渗透、内吸活性等特点，几乎可以防治所有真菌（卵菌纲、藻菌纲、子囊菌纲和半知菌纲）病害[3-4]。嘧菌酯是线粒体呼吸抑制剂，通过在细胞色素b和C1间电子转移抑制线粒体的呼吸，使线粒体呼吸受阻、不能产生ATP，最终导致细胞死亡。嘧菌酯的水溶性较好，易随地表水进入水环境形成污染。水解作用是农药进入水体后发生的最重要化学反应之一，水解反应改变了农药母体化合物的结构，可能形成一个或多个中间体，与母体化合物相比，大多数水解产物的毒性降低。作为农药在水环境中非生物降解的一个主要途径，水解作用与农药在环境中的持久性密切相关，不仅是影响农药在环境中的归宿机制的重要判断依据之一，也是评价农药在水体中残留特性的重要指标[5-6]。目前，国内外对于嘧菌酯的研究主要集中在应用、开发、残留消解动态等方面[3，7-9]，对嘧菌酯及该类化合物的研究尚未见报道。本文研究了嘧菌酯在不同水环境中的水解动力学，旨在为指导嘧菌酯的合理使用及其环境特性评价提供科学依据。

1材料与方法

1．1试剂药品嘧菌酯标准品（纯度96.0%，先正达（中国）投资有限公司产品）；三氯甲烷、正己烷、氯化钠、丙酮均为分析纯。

1.2主要仪器设备Agilent6890型（ECD检测器）气相色谱仪；KQ-250DE型超声波清洗器；高压灭菌锅；电子天平（精度0.0001g）；HG303-3型恒温培养箱；SHB-Ⅲ型循环式多功能真空泵；旋转蒸发仪等。

1.3缓冲溶液配制方法[10]pH=5的缓冲溶液：500mL0.10mol•L-1的邻苯二甲酸氢钾溶液中加入239mL0.10mol•L-1的氢氧化钠溶液，用蒸馏水定容至1000mL。pH=7的缓冲溶液：500mL0.10mol•L-1的磷酸二氢钾溶液中加入296mL0.10mol•L-1的氢氧化钠溶液，蒸馏水定容至1000mL。pH=9的缓冲溶液：250mL0.10mol•L-1的硼砂中加入250mL0.10mol•L-1的氯化钾溶液和213mL0.10mol•L-1的氢氧化钠溶液，蒸馏水定容至1000mL。上述缓冲溶液及供试验用的器皿均需高压灭菌。

1.4水溶液中嘧菌酯的残留分析方法取10mL供试水样于250mL分液漏斗中，加入20mL5％NaCl溶液，30mL三氯甲烷萃取3次，有机相经无水硫酸钠脱水后，在旋转蒸发仪上减压浓缩至近干，氮气吹干，用5mL正己烷定容待GC-ECD检测。

1.5气相色谱条件Agilent6890气相色谱仪配μ-ECD检测器；色谱柱为HP530.0m×320μm×0.25μm毛细管柱；进样口温度280℃；检测器（ECD）温度300℃；柱温采用程序升温如下：70℃保持1min，以25℃•min-1升到200℃保持3min，再以20℃•min-1升到260℃保持5min。载气N2；流速1.0mL•min-1；尾吹气流量60.0mL•min-1；进样量1μL。

1.6水解实验方法1.6.1嘧菌酯在不同pH条件下水解实验设计取1mL500mg•L-1嘧菌酯标准母液于100mL容量瓶中，分别用pH为5.0、7.0、9.0的缓冲溶液定容至刻度，摇匀，将此溶液转移至100mL三角瓶中，为抑制微生物的生长，分别加入0.1gNaN3固体。然后将它们放入25℃恒温避光培养箱（±1℃）中；每个处理设置两次重复。于加药后0、1、3、5、7、14、20、30、40、60d分别摇匀后移取10mL反应液检测嘧菌酯残留量。1.6.2嘧菌酯在不同温度条件下水解实验设计取1mL500mg•L-1嘧菌酯标准母液于100mL容量瓶中，加入pH7.0的缓冲溶液至刻度，摇匀，将此溶液转移至100mL三角瓶中，为抑制微生物的生长，分别加入0.1gNaN3固体。然后将它们分别放入15、25、35、45℃恒温避光培养箱（±1℃）中；每个处理设置两次重复。于加药后0、1、3、5、7、14、20、30、40、60d分别摇匀后移取10mL反应液检测嘧菌酯残留量。

2结果与分析

2.1标准曲线准确称取嘧菌酯标准品0.0100g，用丙酮配成1000mg•L-1的标准溶液，采用系列稀释法稀释至所需的浓度（0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg•L-1），在上述色谱条件下分别进行测定，以进样量为横坐标和峰面积为纵坐标绘制标准曲线。其回归方程为：Y=26784x-2663.9（r=0.9995）

2.2添加回收率与相对标准偏差取蒸馏水10mL于分液漏斗中，分别添加嘧菌酯1、5、10mg•L-13个水平，重复5次，按照上述前处理方法和仪器条件测定添加回收率，结果见表1。pH=5的缓冲溶液中添加1mg•L-1的嘧菌酯样品以及空白样品及嘧菌酯标准品的色谱图分别如图1~图3所示。

2．3不同pH值缓冲溶液中嘧菌酯的水解取500mg•L-1嘧菌酯标准溶液1mL于100mL容量瓶中，分别用pH为5.0、7.0、9.0的缓冲溶液定容至刻度使得溶液中嘧菌酯含量均为5mg•L-1，为抑制微生物的生长，分别加入0.1gNaN3固体。然后将它们放入25℃恒温培养箱（±1℃）中（避光）；每个处理设置两次重复。结果见图4。从图4和表2可知，不同pH缓冲溶液值对溶液中嘧菌酯的水解具有明显的影响。在25℃恒温培养下（±1℃），嘧菌酯在pH5、pH7、pH9的缓冲液中的水解速率随缓冲液pH值增大而增大。即嘧菌酯在碱性环境中水解较快，这可能与分子上具有酯、醚基和CN键有关。

2.4不同温度条件下嘧菌酯在缓冲溶液中的水解取1mL500mg•L-1嘧菌酯标准母液于100mL容量瓶中，加入pH7.0的缓冲溶液至刻度，摇匀，将此溶液转移至100mL三角瓶中，为抑制微生物的生长，分别加入0.1gNaN3固体。然后将它们分别放入15、25、35、45℃恒温避光培养箱（±1℃）中；每个处理设置两次重复。结果见图5。从图5和表3可以发现，温度对溶液中嘧菌酯的水解具有一定的影响。在25℃恒温培养条件下（±1℃），嘧菌酯在温度为15、25、35、45℃的缓冲液中的水解速率随温度的升高而增大。说明高温中嘧菌酯水解较快。建议利用LC-MS、NMR和IR等确定其水解代谢产物结构，从而明确其降解机理。NaN3对酶活性有明显抑制作用[11]，属高毒物质。叠氮钠是一种高效的化学诱变剂，可以引起细胞DNA的损伤，具有致癌作用[12]。

3结论

本研究建立的嘧菌酯在溶液中的前处理方法简便，快捷，容易操作。嘧菌酯在不同缓冲溶液中的水化学降解均符合一级动力学方程，嘧菌酯在水中较易降解。（1）嘧菌酯在水中相对稳定，在pH5、pH7、pH9缓冲液中的水解随溶液体系pH值升高而增大；嘧菌酯在pH9的缓冲溶液中的降解比在pH5的缓冲溶液中要快近3倍，说明溶液酸碱度对嘧菌酯的水解速率影响较大。在缓冲溶液中嘧菌酯的水解速率依次为pH9>pH7>pH5，说明嘧菌酯在酸性环境中对水解较稳定，在碱性溶液中容易水解。在pH5、pH7、pH93种缓冲溶液中的水解半衰期分别为47.9、29.6、17.2d。（2）嘧菌酯随温度的不同其水解速率常数也随之有所变化，随温度的增加其水解速率增大，在起始浓度为2mg•L-1的缓冲液中，其降解半衰期分别是56.1、37.7、15.5、13.6d，说明高温促进其水解。

特别申明：本站部分文章由网络收集整理.如需使用，请与原作者联系,如有侵权，请联系我们删除,谢谢！