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摘要：行使195份矮败小麦与津强5号杂交获得的高代品系，研究了7OE亚基在其中的分布，切磋7OE亚基材料与揉面特征之间的相干。效果注解，195份材料中有6份材料扩增出447 bp的片段，占所检测品系的3.07%。7OE亚基对小麦的揉面特征部门指标有较着的正面影响，峰值高度、8分钟带宽在有无7OE基因间变异系数差异较大，含7OE亚基材料与非7OE亚基材料在8分钟带宽这一指标达到极较着差异。7OE亚基对改良小麦品格浸染较大，8分钟带宽可作为品格剖析的主要指标之一，此符号特异性较好，可用于中国小麦的品格改良。
关键词：矮败小麦； Bx7OE；揉混特征；分子符号
Study on 7OE Subunit Introduction and Flour Mixing Properties of Wheat
WANG Jian-he, LIANG Dan, SHI Xiao-wEi, FENG Gang,WANG Cong-lEI, SHI Si-fa,WANG Ji-zhong
(College of Gardens and Horticulture, Qingdao Agriculture University, Qingdao, Shandong 266109, China)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: With aim to investigate the presence of the subunit 7OE and its relationship of the quality parameters, a total of 195 advanced lines from the dwarf male-sterile wheat and Jinqiang 5 were tested by a STS markers and mixograph factors. The results suggested that the markers TaBAC1215C06-F517/R964 could amplify a 447-bp in 6 lines, which indicated the presence of Bx7OE in these lines, with a frequency of 3.07%. The subunit 7OE that had a significantly better effect on mixograph factors showed more positive effects than its alternative alleles on peak time and eight minute width, and significantly better effects on eight minute width than non-7OE. Therefore, the study suggested that eight minute width might be a potential factor for improvement of quality; the STS marker could be used to detect the presence of Bx7OE gene in wheat quality improved in China.
Key words: dwarf male-sterile wheat; Bx7OE; mixograph factors; molecular marker
小麦贮藏卵白决意小麦的品格特征，决意面团的弹性和延迟性。高分子量麦谷卵白亚基（HMW-GS）仅占小麦贮藏卵白的10%，但对加工品格起着决意性浸染。HMW-GS由染色体1A、1B、1D长臂上的位点节制，这些位点总称为GLu-1位点。分歧HMW-GS亚基当面团特征和烘烤品格有着分歧的影响。Glu-A1编码的1和2*亚基，Glu-B1编码的7+8、17+18、13+16和14+15亚基以及Glu-D1编码的5+10亚基均当面包加工品格有正向浸染[1-2]。近年研究发现，1Bx基因的复制导致7亚基的超量表达，这可以较着提高面团强度 [6-7]。国内对7OE亚基也进行了初步研究。张平整齐[4]选用13份含7OE亚基姊妹系材料，行使反相高效液相色谱剖析法（RP-HPLC）和凝胶色谱（SE-HPLC）方式研究了含Glu-B1al（7OE＋8）材料的HMW-GS总量和面团强度。任妍等[5]行使两对STS引物验证了检测7OE引物的特异性，为其快速检测供给了方式。
矮败小麦是用“矮变1号”给太谷核不育小麦授粉，F1不育株再用高秆品种测交所得，中国自立立异的复杂科技功效。矮败小麦的子女群体中一半是异交结子的矮秆雄性不育株和一半自交结子的非矮秆可育株，是理想的轮回选择器械[3]。津强5号品格达国家一级强筋小麦尺度，且各项品格指标与加麦和硬红春相仿，经张平整齐[4]检测含7OE亚基。
Ragupathy 等[8]凭据LTR 逆转座子界限与频频片段的连系区域设计了两个STS 符号并检测了400 多份小麦品种，经任妍研究能有用判定7OE基因，这为快速正确检测7OE基因在本群体中的分布供给了概略。本研究对195份矮败小麦与津强5号杂交获得的高代品系7OE亚基进行分子检测，晓畅此位点等位基因的分布纪律，并检测这批材料的揉混特征，为我国小麦育种供给有用的材料以及分子符号扶持匡助选择方式。
1 材料和方式
1.1 供试材料
195份以津强5号作为轮回亲本与矮败小麦回交2次的高世代品系，2009年种植于天津市武清区周庄村，每区2行，行长2 m，行距30 cm，5 cm点播。对其中9份农艺性状优越的非7OE亚基和6份含7OE亚基材料于2010年进行进一步扩繁，剖析其揉混特征。
1.2 基因组提取
接纳SDS法提取小麦基因组DNA[9]。每份材料离别提取二粒种子的DNA，行使紫外分光光度计检测DNA浓度，终浓度调整至20 ng·μL-1。
1.3 STS符号检测
行使Ragupathy等[8]拓荒的显性STS符号检测Bx7OE基因。引物由天津润泰科技成长有限公司合成。
符号（频频片段与逆转座子左边连系引物）：TaBAC1215C06-F517：5'-ACGTGTCCAAGCTTTGGTTC-3'，
TaBAC1215C06-R964：5'-GATTGGTGGGTGGATACAGG-3'；
PCR回响反映系统为20 μL，含10×PCR Buffer 2 μL，d NTP（A、T、C、G）各200 μmol·L-1，每条引物1 μL (10 mmol·L-1)，Taq DNA聚合酶（Takara）1 U，模板DNA 50 ng。符号1的PCR回响反映法式为：94 ℃变性5 min；94 ℃变性30 s，63 ℃退火30 s，72 ℃延迟1 min，35个轮回；72 ℃延迟5 min。
PCR扩增产物以1.5%的琼脂糖凝胶电泳星散检测，缓冲液系统为1×TAE溶液，180 V电压电泳30 min，溴化乙锭染色后，用Gel Doc XR System扫描成像并存入策画机。
1.4 制粉方式
接纳德国Brabender senior试验磨按AACC26-21A方式制粉。
1.5 揉混特征检测
由美国National公司出产的揉混仪接纳10 g揉面钵按AACC54-40A方式测试，频频2次，取平均值。
1.6 统计方式
接纳DPS统计剖析软件进行较着性对照。
2 效果与剖析
2.1 Bx7OE 的STS符号检测
符号TaBAC1215C06-F517/R964 在含Bx7OE基因的材料中可扩增出一条447 bp的片段，在不含Bx7OE基因的材料中无PCR扩增产物。6份材料扩增出447 bp条带，占所检测品系的3.07%。
2.2 揉混特征检测
对9份田间农艺性状显示好的未带有Bx7OE品系和6份带有Bx7OE品系进行揉混图测定，图2为15份材料中2个材料的揉混特征检测，其中图2（a）为带有Bx7OE基因的材料的揉混图，图2（b）为未带有Bx7OE基因的材料的揉混图。
