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饲料中长期使用抗生素可导致畜禽免疫功能下降,抗生素可在畜禽体内残留,进而危及人类的健康。饲料工业中急需无毒、无害的添加剂。溶菌酶是1922年Alexander Fleming发现的一种能选择性的溶解微生物细胞壁的酶类,它是动物体液和血液中的重要的非特异性免疫因子,是动物免疫防御系统的重要组成成分,具有抗菌、抗病毒、止血、消肿、镇痛及加快组织修复等功能,因此被用于医疗和食品添加剂。利用溶菌酶具有的抗菌消炎和增加机体抗病力的功能,全部取代抗生素,对动物的腹泻有很好的疗效,可提高生长速度,改善肠道环境,提高动物成活率和整齐度,且无残留[1-3]。溶菌酶在畜禽饲料中的应用也越来越受到人们的重视。溶菌酶具有热稳定性强、耐酸性,便于储藏和运输。

饲用溶菌酶可使用粗制品,生产成本低,同时还具有添加量小、容易保存等优点。作为畜禽饲料添加剂酶类,应在饲料加工及通过胃内酸性环境时仍能保持较高的酶活力,溶菌酶所具有的耐热、耐酸特性为其用作饲料添加剂提供了保证[4-5]。本试验对玉米-豆粕日粮添加溶菌酶对肉仔鸡生长性能、代谢及免疫指标的影响进行研究,为溶菌酶的进一步推广应用提供理论依据。

1　材料和方法

1.1　试验材料饲料用溶菌酶(1×109U/kg)。

1.2　试验日粮基础日粮为玉米-豆粕为主的实用日粮,粉料。分为前期(1~3周)和后期(4~6周)2个阶段。基础日粮的组成及营养水平见表1。日粮中不添加任何抗生素。

1.3　试验动物及饲养管理采用单因子试验设计,选用健康、体重相近1日龄AA肉仔鸡320羽,随机分成5组:第Ⅰ组为对照组,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组日粮中分别添加溶菌酶(添加量分别为0·3、0·4、0·5和0·6 g/kg),4个重复,每个重复16羽(公母各1/2)。4层笼养,1~3周杯式饮水器,盘式采食。3~6周常规管理。自由饮水, 自由采食。

1.4　测定指标测定1、21、42日龄各重复鸡只体重及每重复每周耗料量,计算日增重、日耗料和料重比,记录每组鸡的死亡数,计算死亡率进行比较。第14日龄开始预试,16日龄开始登记采食量, 连续记录3 d,17~19日龄收集排泄粪便,在65℃烘箱中烘18~24 h,然后在室温的条件下充分回潮后称重、粉碎,过40~60目筛,四分法取样分别测干物质、能量和粗蛋白质的表观代谢率。第21天和42天,每个重复取2只鸡(公母各占 1/2),心脏采血5~8 mL,一部分分离血清,离心 (3 000 r/min),4℃保存测定血清抗体IgG含量和血液新城疫抗体效价(HI)及血清中总蛋白、白蛋白及球蛋白的含量。采血完后剖解,取胸腺、脾脏、法氏囊,称量记录重量。

1.5　统计分析方法试验数据采用SPSS 12.0软件进行方差分析、多重比较,试验数据采用平均值±标准差表示。

2　结　果

2.1　溶菌酶对肉仔鸡生长性能的影响由表2可知,在日粮中添加溶菌酶可以提高肉仔鸡的日采食量、日增重和降低料重比。前期(0~3 周)时,日采食量:试验组与对照组相比,都有提高的趋势,但差异都不显著(P>0·05);日增重:Ⅲ组、Ⅳ 组和Ⅴ组与Ⅰ组比较分别提高5·64%(P<0·05)、 6·36%(P<0·05)和4·81%(P<0·05);料重比:Ⅳ 组与Ⅰ组比较降低了3·65%(P<0·05)。后期(4~ 6周)时,日增重:Ⅳ组与Ⅰ组比较提高了4·69% (P<0·05);料重比:Ⅳ组和Ⅴ组与Ⅰ组比较分别降低了7·25%(P<0·05)和6·22%(P<0·05)。全期 (0~6周)时,日增重:Ⅳ组与Ⅰ组比较提高了 5·08%(P<0·05);料重比:Ⅳ组与Ⅰ组比较降低了 8·99%(P<0·05)。

3　讨　论

3.1　溶菌酶对免疫指标的影响溶菌酶具有改善和增强巨噬细胞吞噬和消化功能,激活白细胞吞噬功能,并能改善细胞抑制剂所导致的白细胞减少,从而增强机体的抵抗力。溶菌酶还具有激活血小板的功能,可以改善组织局部血液循环障碍,分解脓液,增强局部防卫功能,从而体现其止血、消肿、加快机体损伤组织的修复作用。

它还可以作为一种宿主抵抗因子,对组织局部起保护作用[6-8]。组织形态学及脏器重量、脏器指数也是衡量动物功能的重要指标,尤其是脏器重量和体积是一个重要的观察指标,实验动物脏器重量、脏器指数是动物试验中常用的重要基础数据。鸡的免疫系统分为三个系统,即体液免疫系统、分泌免疫系统及细胞免疫系统。

体液和分泌免疫系统又属于法氏囊(B细胞)依赖系统,法氏囊是一个重要的中枢免疫器官, 为禽类所特有,而细胞免疫系统为胸腺(T细胞)依赖系统,脾脏为外周免疫器官,在体液免疫中发挥重要作用;在捕获和处理抗原方面具有重要作用。胸腺为中枢免疫器官是T淋巴细胞成熟分化的场所; 脾脏、胸腺、法氏囊能反映免疫器官发育和免疫细胞功能状况,间接反映了机体的免疫水平[9-10]。饲料中添加溶菌酶的第21天,Ⅳ组和Ⅴ组的法氏囊相对重量较Ⅰ组分别增加明显(P<0·05),第 42天,Ⅲ组和Ⅳ组的胸腺相对重量较Ⅰ组分别增加明显(P<0·05),说明添加溶菌酶可促进胸腺的发育,延缓胸腺的萎缩,从而维持机体特异与非特异免疫功能,其中0·5 g/kg添加组效果较好。

饲料中添加溶菌酶的第21天,Ⅳ组和Ⅴ组的法氏囊相对重量较Ⅰ组分别增加明显(P<0·05),第 42天,Ⅴ组的法氏囊相对重量较对照组增加明显 (P<0·05),表明添加溶菌酶可促进法氏囊的生长发育,促进B淋巴细胞的生长,从而提高抗体水平。其中500 g/t添加组效果较好。接种鸡新城疫Ⅰ系苗可增强机体免疫力。饲料中添加溶菌酶的第21天各试验组新城疫效价虽较对照组有所提高,但不明显;第42天各试验组新城疫效价则较对照组明显提高(P<0·05),表明添加溶菌酶可提高HI水平,可延长HI值高峰期,从而在较长时期内增强动物的抗病能力。血清蛋白可分为白蛋白、球蛋白两类。

其中白蛋白决定血浆的胶体渗透压,对于维持机体的水平衡有重要作用;球蛋白参与物质的运输和免疫作用。球蛋白几乎全是免疫球蛋白(Ig),其中IgG是血清中含量最高的Ig,约占其总量的75%。