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                    作者：巩长芹，周礼玲，王永平，常筠,张师愚

【择

【摘要】  目标 成立益母草中益母草碱的HPLC检测要领。要领 C18色谱柱，活动相：甲醇?pH=1.7的醋酸/醋酸钠缓冲液（体积比85∶15），流速0.6 mL·min-1，检测波长277 nm，迅速度0.1AUFS，柱温25 ℃。功效 益母草药材中益母草碱的质量分数为0.015％;均匀接纳率为100.08%，RSD为0.15%。结论 高效液相色谱直接检测益母草碱，轻盈易行，功效精确靠得住。

【关键词】  益母草；益母草碱；高效液相色谱法

　　益母草为唇形科植物益母草(Leonurus heterophyllus Sweet)的干燥地上部门，以花蕾期的地上部门的干品或鲜品入药，性味苦、辛、微寒，归肝、心包经，具有活血调经、化瘀生新、紧缩子宫之功能，主治月经不调、胎漏难产、行经腹痛及产后淤阻等证，素有“血家圣药”、“经产良药”之称。益母草中首要含有生物碱类、二萜类、甾醇、黄酮类、有机酸、脂肪酸类等因素。益母草中生物碱以益母草碱和水苏碱为主［1］。药理浸染研究证明，益母草中的首要有用因素益母草碱(leonurine)具有明显的直接扩张外周血管、增进血流量、抗血小板聚积活性等浸染［2］，可有用的低落血液黏度和进步红细胞的变形手段，还可调经止血，掩护心肌缺血再灌注损伤。在《中国药典》［3］及各级别尺度中，益母草药材和益母草制剂的质量节制均是以总生物碱为指标，文献［4，5］则回收雷氏盐剩余比色法测定益母草中盐酸水苏碱。而对付益母草碱的含量却没有要求，这样不能担保益母草及其制剂的安详、有用。以益母草为质料的多种制剂，如益母草胶囊、益母草冲剂、益母草口服液、益母草浸膏、益母草片等都是临床上的常用品,除个体品种在《中国药典》2005年版增进了含量测定项目外,大都品种无同一尺度,有的品种则无含量测定要求,使市售的产物质量得不到担保。以是成立一个以益母草碱为指标直接检测益母草药材及其制剂的同一的质量尺度是很故意义的。本文实行成立益母草碱的高效液相色谱直接检测要领。

　　1  仪器与原料　　

　　高效液相色谱仪LabAlliance， LabAlliance紫外检测器Model 5000， Phenomenex C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm),Anastar色谱事变站；紫外分光光度计，SHIMADZU公司，UV2401PC。甲醇为一级色谱纯；益母草碱比较品（购于安徽省新星药物开拓有限责任公司，纯度为99％）；益母草（购于天津市南开区协和药店，经我校中药学院中药判断教研室张丽娟副传授判断）。

　　2  要领与功效

　　2.1  紫外光谱最大接收测定　　在200~400 nm之间举办全波长扫描，扫描图如图1所示，益母草碱在215 nm和277 nm处均有接收峰，最大接收277 nm，故选用277 nm作为高效液相测定的波长。

　　2.2  色谱前提色谱柱：Phenomenex C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，活动相：甲醇?pH=1.7的醋酸/醋酸钠缓冲溶液（体积比85∶15），流速：0.6 mL·min-1，检测波长：277 nm，迅速度：0.1AUFS，柱温：25 ℃，进样量：20 μL。

　　2.3  比较品溶液的制备慎密称取盐酸益母草碱0.6 mg，溶于25 mL活动相中，摇匀，制得0.024 mg·mL-1比较品溶液。别离取比较品溶液0.5、 1.0、1.5、2.0、5 mL溶于5 mL活动相中，别离摇匀，得质量浓度别离为0?0024、0.0048、0.0072、0.0096、0.024 mg·mL-1的比较品溶液。各用微孔滤膜滤事后，按“2.2.1”项下的色谱前提进样测定（HPLC说明如图2所示），测得各溶液峰面积，计较得回归方程：C=2.222×10-8A－6.213×10-4,r=0.9998。益母草碱在0?0024~0.024 mg·mL－1间泛起精采的线性相关。

　　图1  全波长扫描图（略）

　　Fig.1   Wavelength scanning of motherwort alkaloids

　　图2  比较品HPLC说明图（略）

　　Fig.2  HPLC chromatogram of reference substance

　　2.4  样品溶液的制备慎密称取益母草提取物粗品2.2 mg，溶于10 mL活动相中，摇匀即得。

　　2.5  样品溶液的测定取样品溶液用微孔滤膜滤事后，按“2.2.1”项下的色谱前提进样测定，测得溶液的峰面积为1 099 398，计较质量分数为10.82％，在原药材中的质量分数为0.015％。

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