摘 要:目的:研究纳米粒径二氧化钛钛片与人Tenon’S囊成纤维细胞的相容性。方法:将人Tenon’S囊成纤维细胞与纳米粒径二氧化钛钛片体外复合培养,设细胞与二氧化钛钛片复合培养的对照组和单独细胞培养的阴性对照组,倒置显微镜观察计算人Tenon’S囊成纤维细胞接种后的粘附情况,MTT法检测材料对细胞增殖影响。结果:人Tenon’S囊成纤维细胞在纳米粒径二氧化钛钛片上有良好的粘附、生长,MTT检测显示纳米粒径二氧化钛钛片对细胞增殖的影响大于二氧化钛钛片。结论:纳米粒径二氧化钛钛片具有良好的细胞相容性,可望作为眼台栓钉的材料。
关键词:纳米粒径二氧化钛钛片;人Tenon’S囊成纤维细胞;增殖
对于因眼病或外伤后眼球不保的患者,行眼球摘除+义眼台植入是治疗及美容的有效办法之一。Jordan等报告羟基磷灰石(Hydroxyapatite;HA)义眼座钻孔及栓钉置入后各种并发症发生率达37.5%[1]。在术后结膜修复过程中,成纤维细胞起着十分重要的作用。而置入栓钉能与结膜良好的愈合,所用材料与成纤维细胞相容性至关重要。自2010年1月~2010年12月采用体外细胞培养法对纳米粒径二氧化钛进行了细胞相容性研究,为寻找更为理想的眼台栓钉材料提供依据。现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料:材料与试剂为人Tenon’S囊成纤维细胞(上海科兴商贸细胞库),纳米粒径二氧化钛钛片、二氧化钛钛片(受赠于潍坊医学院附属医院),DMEM培养基、0.25%胰蛋白酶、MTT试剂、二甲基亚砜(DMSO)(北京中杉生物有限公司),二氧化碳全湿空气培养箱(USA),倒置显微镜(Nikon公司),全自动酶标仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。 1.2 试验方法:①细胞粘附率测定:将纳米粒径二氧化钛钛片剪切为5 mm×5 mm×2 mm大小,取24块灭菌后置于24孔培养板内作为试验组,24孔置入相同大小的二氧化钛钛片为对照组,24孔不加材料为阴性对照组。将浓度为1×105/ml的人Tenon’S囊成纤维细胞以500 μl/孔接种于各组中,于培养箱中培养。接种后1 h、2 h、4 h每组各8孔吸出培养液,将已贴壁生长的细胞用胰酶消化后计数,计算粘附。②MTT法测定细胞生长曲线:设96孔培养板上40孔不加任何材料为第1组,取40块5 mm×5 mm×2 mm大小的二氧化钛钛片置于96孔培养板为第2组,40孔加入相同大小的纳米粒径二氧化钛钛片为第3组。将浓度为1×105/ml的人Tenon’S囊成纤维细胞以100 μl/孔接种于1、2、3组中,培养箱内培养。于细胞接种后第2、3、4、5、6天,每天每组各取8孔,每孔加入MTT试剂20 μl,培养箱内孵育4 h,加入DMSO 150 ul,用酶标仪在570 nm下进行吸光度检测,重复3次,以培养时间为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标,描绘生长曲线。 1.3 统计学方法:采用SPSS 17.0统计软件,数据以均数±标准差()表示,细胞粘附率采用单因素方差分析,组间比较采用LSD法,MTT增殖活度采用重复测量因素的方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 细胞的粘附率测定:细胞在试验组、对照组和阴性对照组中的1 h粘附率分别为46.1%、34.0%和52.4%,接种2 h后粘附率分别为70.9%、67.2%和76.2%,接种4 h后粘附率分别为77.0%、67.2%和81.3%,三组之间两两比较,
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