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摘要:用K—B法检测6种抗生素对52株口腔疾患的兼性厌氧菌与需氧菌的药物敏感性,同时用试管稀释法测定5种抗菌药物对6种常见分离株的最小抑菌浓度。结果6种抗生素对52株分离株的敏感率以氯霉素(80.8%)和庆大霉素(53.9%)最高,其次是四环素(38.5%)和红霉素(28.9%),羧苄青霉素(23.1%)和先锋霉素(15.3%)最低。5种抗菌药物对6种常见分离株的MIC测定结果以克林霉素效果较好,林可霉素次之,乙酰螺旋霉素基本耐药。提示上述抗菌药物的抗菌谱有所不同,以庆大霉素或克林霉素效果最好。
关键词:口腔疾病;兼性厌氧菌;需氧菌;抗生素;药物敏感试验.
KEY WORDS:Oral disease;Facultative anaerobes;Aerobes,Antibiotics;Drug Susceptibility
口腔疾病的病因,常有某些兼性厌氧菌和需氧菌的混合感染[1～3]。因此,临床治疗口腔疾病时,需要使用抗兼性厌氧菌和需氧菌药物[4]。而且抗生素应用已成为口腔疾病治疗的重要环节,体外药敏试验是临床选择抗生素的重要依据。为此我们进行了常用抗菌药物对52株口腔疾病患者牙周内容物中分离获得的兼性厌氧菌和需氧菌的体外药敏试验,给临床合理选择抗菌药物治疗口腔疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验菌株 包括3株标准质控菌株和52株临床分离菌株。前者分别是金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。后者菌株分类情况(见表1),来源于附属口腔医院或来自寄生虫学教研室检查的口腔疾病患者尤其是牙周病患者,均用消毒的牙科探针获取牙周内容物。加入生理盐水涂片进行革兰氏染色,同时立即将标本分区划线于血平板和MAC平板上,37℃孵育24 h～48 h,待长出菌落后进一步鉴定。7d后未见细菌生长的报告阴性并弃去。分离菌株属、种的鉴定主要依据中华人民共和国卫生部医政司编《全国临床检验操作规程》(第2版)完成。
1.2 药敏方法
1.2.1 纸片扩散法:应用国际通用的K—B法。纸片由上海市医学化验所与浙江军区后勤部卫生防疫站检验所提供,抗生素有氯霉素、庆大霉素、四环素、红霉素、羧苄青霉素和先锋霉素。并由3株标准株提供质控。纸片均在有效期内使用。
1.2.2 MIC测定:应用试管稀释法检测抗菌药物最小抑菌浓度(MIC),并计算出MIC50和MIC90。选择常见的6种分离株进行试验,抗菌药物如下:甲硝唑由武汉制药厂生产,批号980764;替硝唑由湖北广济制药厂生产,批号980106;乙酰螺旋霉素由杭州中美华东制药有限公司生产,批号980812;林可霉素由浙江泰康制药公司生产,批号930816;克林霉素由宁波市第三制药厂生产,批号9303176。甲硝唑、替硝唑和乙酰螺旋霉素先用少量无水乙醇溶解,再用pH7.4,0.01 mol·L-1的PBS稀释至所需浓度,林可霉素和克林霉素的盐酸盐则直接用PBS溶解和稀释,然后过滤除菌,分别使药物终浓度为0.25μg～256μg·ml-1。
2 结果
2.1 6种抗生素对52株临床分离株的敏感性分布:敏感率从高到低依次是氯霉素(80.8%)、庆大霉素(53.9%)、四环素(38.5%)、红霉素(28.9%)、羧苄青霉素(23.1%)和先锋霉素(15.3%)。假单胞菌属仅对羧苄青霉素敏感;链球菌属除羧苄青霉素和先锋霉素外基本上敏感;假丝酵母菌属对本实验抗生素均耐药;这与它是真菌之一有关。氯霉素和庆大霉素对各种菌属敏感性较好,羧苄青霉素仅对假单胞菌属和变形杆菌属敏感(见表2)。
2.2 5种抗菌药物对临床常见6种分离株的MIC测定结果:林可霉素和克林霉素效果较好,尤其克林霉素效果最好;乙酰螺旋霉素除粘液奈瑟菌外基本耐药;甲硝唑和替硝唑对各种菌均无效(见表3)。
3 讨论
随着口腔疾病特别是牙周病细菌病因学的确立,抗生素已成为治疗口腔疾病的重要手段。常通过口服或局部途径给药,虽然给药途径不同,对细菌的抗生素敏感性要求有所差别,但是体外药敏试验仍是临床选择抗生素最重要的依据。近年来,抗菌药物对厌氧菌的药敏较多报道[4～7],但对兼性厌氧菌或需氧菌的报道甚少[4]。本研究结果显示,52株口腔疾病患者分离株对6种抗生素敏感率以氯霉素和庆大霉素最高,其次是四环素和红霉素,最低的是羧苄青霉素和先锋霉素。5种抗菌药物对6种常见菌的MIC测定结果以林可霉素和克林霉素效果较好,尤其是克林霉素。临床常用抗厌氧菌的甲硝唑和替硝唑对上述细菌无效,乙酰螺旋霉素效果亦差,提示口腔疾病的混合感染患者仅用甲硝唑或替硝唑是不够的,尚需同时使用对兼性厌氧菌或需氧菌的有效药物。氯霉素对造血系统有毒性;羧苄青霉素必须在大剂量服用时才能达到有效的血清浓度,且仅对铜绿假单胞菌和普通变形杆菌有效;红霉素对胃有刺激作用,四环素会使牙齿变黄,且两者敏感率不高,因此以选择庆大霉素和克林霉素治疗为好。张秀珍等报道[6]羧苄青霉素和氯霉素对G+厌氧菌的MIC值也有上升,结合我们的结果,建议一般不采用羧苄青霉素和氯霉素,除非铜绿假单胞菌感染才用羧苄青霉素。铜绿假单胞菌除对羧苄青霉素和克林霉素外均耐药,表现出多重耐药现象,给治疗带来困难,提示预防该菌感染具有特别重要的意义。
总之,口腔疾病特别是牙周病是以厌氧菌为重要致病菌[8],也可由齿龈内阿米巴所致[9]的治疗除用抗厌氧菌药物甲硝唑或替硝唑外,尚需同时使用抗兼性厌氧菌或需氧菌的庆大霉素或克林霉素治疗,以获得更好的治疗效果。
参考文献
[1]薛友清,赵虎.牙周牙髓病牙周袋与髓腔细菌相关性研究,实用口腔医学杂志,1991,7(4):232～233.
[2]Moenning JE,Nelson CL,and Kohler RB.The Microbiology andChemtherapy of Odontogenic infections, J Oral Maxillofac Surg1989,47(9):976985.
[3]Lewis MAD,MacFarlane TW,and McGowan DA.Quantitativebacteriology of acutedento-alveoler abscesses,J Med Microbiol1986,2(2):101～104.
