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摘　要:　对采自青岛和日本北海道、青森、爱知、香川、福冈近海的6个玉筋鱼群体样本进行了形态特征比较和同工酶分析。

形态学研究结果显示,玉筋鱼群体在分节特征上表现出不同程度的差异。北海道和青森群体的背鳍鳍条、胸鳍鳍条、臀鳍鳍条、脊椎骨和鳃耙数的平均值分别为57,14,31,65和27,其他4个群体分别为54~56,14,29~30,63~64和20~22;经筛选的11个量度特征分析结果表明,北海道和青森群体间的相似性高,与其它4个群体存在显著差异。水平凝胶电泳分析结果表明,检测的279个个体的7个基因位点中,香川、爱知和青岛3个玉筋鱼群体均没有出现多态位点,福冈群体的多态位点比例为0.142 9,而北海道和青森群体的多态位点比例分别为0.571 4和0.428 6,明显高于以上4个群体,其遗传多样性丰富。根据分节特征、量度特征和遗传距离得到的群体聚类分析结果均将6个群体分为2大支,其中北海道和青森2个群体为1支,其他4个群体为1支,表明2支玉筋鱼群体间存在明显分化。

关键词:　玉筋鱼;形态学;同工酶;种群

玉筋鱼属鲈形目、玉筋鱼科、玉筋鱼属(Am-modytes),俗称面条鱼、沙钻,为冷温性小型鱼类,在我国的渤海、黄海北部以及朝鲜半岛、日本和俄罗斯远东海区都有分布。据有关资料记录,全世界范围玉筋鱼共有7种,分别分布于地中海、北大西洋、北太平洋亚洲和美洲沿海。在我国,只有A. personatusGirard1种存在[1];在日本存在玉筋鱼和太平洋玉筋鱼A.hexaperus2个种[2]。国内关于玉筋鱼的研究报道很少,多集中在能量生态学、生物学和资源管理等方面[3-7]。迄今为止,有关黄、渤海与日本邻近海域玉筋鱼群体间的亲缘关系及群体划分尚无研究报道。本论文利用形态学观察、常规的生物学测定、同工酶分析等方法分别对采自青岛和日本青森、香川、北海道、爱知、福冈6个群体的玉筋鱼样本进行了比较研究,初步探讨中国和日本玉筋鱼群体间的亲缘关系,为进一步的玉筋鱼研究提供基础资料。

1　材料与方法

1.1材料

实验用玉筋鱼6个群体样本分别于2004~2005年采自日本北海道到福冈近海以及青岛近海(见图1),-20℃冷冻保存。

1.2方法

1.2.1形态学方法　　6个群体测量样本数见图1。对样本的分节特征(背鳍、胸鳍、臀鳍、脊椎骨、鳃耙)进行计数。用直尺测量量度特征体长(BL)、体高(BD)、吻长(SL)、头长(HL)、眼后头长(PL)、尾柄长(CPL)和尾柄高(CPW),所测长度精确到0.1 cm;用游标卡尺测量眼径(ED)、眼间隔(EI),所测量长度精确到0.01cm。用电子天平测量体重(BW),重量精确到0.1 g。采用EXCEL和SPSS软件进行数据统计分析。

1.2.2同工酶方法　　取冷冻样本肌肉组织进行电泳。电泳方法按照日本水产资源保护协会水平凝胶电泳法进行[8-9]。试验共检测了5种酶,电泳缓冲系统为CAPM-7.0。电泳槽和电泳仪分别为北京市六一仪器厂生产的DYY-III-8B型电泳仪,凝胶淀粉为Sigma公司生产的水解马铃薯淀粉。电泳在恒温(4℃)、恒流(50 mA)的条件下进行。电泳图谱中基因位点、等位基因、基因型的命名和标记参照Shakleeet al和Whit-more的方法[10-11]。

由基因型数据统计得出每个位点的等位基因有效数目、等位基因频率、多态位点比例、观测杂合度等。本实验分析多态位点采用0.99水平标准,即当1个位点的主基因频率≤0.99时,则认为其为多态位点。等位基因有效数目、多态位点比例、平均杂合度、遗传距离等的计算参照Nei[7]和日本水产资源保护协会[8]的方法。

2　结果

2.1分节特征

分节特征结果显示,北海道、青森群体背鳍鳍条数平均值分别约为57,57,高于爱知、香川、福冈和青岛4个群体的为55,54,55,55;6个群体的胸鳍鳍条数平均值均为14;臀鳍鳍条数平均值分别为31,31,29,30,29,31;脊椎骨数平均值分别为65,65,64,65,63,63;而鳃耙数平均值分别为27,27,21,22,20,21,北海道和青森2个群体的鳃耙数明显高于其它4个群体(见表2)。

2.2量度特征

对6个群体的10个量度特征两两组合并从中筛选出11个形态变量,对其平均数进行了差异显著性分析。结果显示,北海道与青森群体之间仅有PL/ED变量存在显著性差异;北海道与香川群体之间11个变量全部存在显著性差异;北海道与爱知以及福冈群体之间均有10个变量存在显著性差异,仅在变量SL/H上差异不显著;北海道与青岛群体之间有9个变量存在显著性差异,在变量SL/HL,EI/HL上差异不显著;青森与香川群体之间11个变量全部存在显著性差异;青森与爱知群体之间有10个变量存在显著性差异,仅在变量SL/HL上差异不显著;青森与福冈群体之间有9个变量存在显著性差异,有2个变量(CPL/BL,SL/HL)差异不显著;青森与青岛群体之间有9个变量存在显著性差异,在变量SL/HL,EI/HL上差异不显著;爱知与香川群体之间有8个变量存在显著性差异,有3个变量(HL/BL,BD/BL,CPW/BD)差异不显著;爱知与福冈群体之间有4个变量(HL/BL,BD/BL,ED/HL,PL/ED)存在显著性差异;爱知与青岛群体之间有6个变量(BL/BW,HL/BL,BD/BL,EI/HL,CPW/BD,EI/ED)存在显著性差异;香川与福冈群体之间有8个变量存在显著性差异,有3个变量(ED/HL,CPW/BD,PL/ED)差异不显著;香川与青岛群体之间11个变量全部存在显著性差异;福冈与青岛群体之间有7个变量(BL/BW,HL/BL,SL/HL,ED/HL,EI/HL,CPW/BD,EI/ED)存在显著性差异。由此可见,北海道和青森2个玉筋鱼群体相似性较高,与其它4个玉筋鱼群体存在较大差异。

2.3同工酶分析

在分析的5种酶中,共检测到7个基因位点,MDH-1*,MDH-2*,MDH-3*位点在6个群体中均为单态;青森群体在IDHP*位点上呈多态,在其他5个群体中为单态;北海道和青森2个群体在PGM*位点上呈多态,在其他4个群体中为单态;青森、北海道和福冈3个群体在G3PDH*位点上呈多态,在另3个群体中表现为单态;青森、北海道2个群体在LDH*位点上呈多态,而在其他4个群体中为单态。

3　讨论

在群体的比较、划分研究中,形态学方法是最基本,也是最主要的研究方法之一。Lindberg[13]对日本近海玉筋鱼和太平洋玉筋鱼进行了形态比较,得出玉筋鱼的脊椎骨数60~66、背鳍鳍条数51~56,而太平洋玉筋鱼的脊椎骨数在67~72、背鳍鳍条数56~64。

北口孝郎[9]认为,北海道北部水域存在玉筋鱼和太平洋玉筋鱼2个种,玉筋鱼的脊椎骨数为65或66、臀鳍鳍条数为31,太平洋玉筋鱼的脊椎骨数为68、臀鳍鳍条数为29或30。Hatanaka[15]和Hashimoto[16]根据脊椎骨数分别把混栖于日本宫城县近海和鸟取县近海的2个玉筋鱼群体区分开,其脊椎骨数分别为65和63。