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由于目前尚无有效的HIV-1 疫苗，感染后的药物治疗仍然是针对该疾病的主要治疗方法。临床上用于艾滋病治疗的抗HIV-1 药物共有 5 类：融合抑制剂、核苷类逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制· 356 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2009, 44 (4): 355 361 剂、整合酶抑制剂和蛋白水解酶抑制剂。但HIV-1 是 RNA病毒，具有高变异性，因此在一定时间的药物治疗后，会生成稳定的耐药病毒。据统计, 在接受药物治疗的艾滋病患者中大约 50%对至少一种药物产生抗性 [2, 3] 。

因此，研发新结构类型的对耐药HIV-1 有抑制作用的化合物是药物发展的方向，而针对现有靶点, 建立耐药型HIV-1 药物筛选方法则是新型药物研发的关键环节。 HIV-1 逆转录酶 (reverse transcriptase, RT) 是 HIV-1 药物研发的一个重要靶点。已上市的逆转录酶抑制剂分为两大类: 核苷类逆转录酶抑制剂 (nucleoside reverse-transcriptase inhibitors, NRTIs) 和非核苷类逆转录酶抑制剂 (non-nucleoside reverse- transcriptase inhibitors, NNRTIs) [4] 。其中 NNRTIs 有奈韦拉平 (nevirapine, NVP)、依法韦伦 (efavirenz, EFV) 、地拉韦定 (delavirdine, DLV) 和依曲韦林 (etravirine, TMC-125)。该类药物作用靶点明确、具有结构多样、高效低毒的特点, 这些特点使其成为抗 HIV-1 治疗的首选药物之一。

但由于奈韦拉平、依法韦伦和地拉韦定均已上市 10 年, 并且其与逆转录酶的作用位点相近, 临床上均已产生了稳定的耐药病毒并且具有多药耐药的特点, 使这 3 个药物的临床应用受到一定的限制 [5] 。针对耐药型病毒的非核苷类逆转录酶抑制剂一直是抗艾滋病药物研究的热点, 2008 年 FDA 批准该类新药依曲韦林上市, 但也有报道显示在依曲韦林治疗组中已经发现耐药的病毒株 [6, 7] 。由于在抗 HIV-1 治疗中非核苷类逆转录酶抑制剂应用非常广泛，使 HIV-1 耐药突变频繁出现而导致原有药物失效。

针对耐药型 HIV-1 模型的建立和药效学的评价，国外已有相关报道 [8, 9] ：研究方法首先是从服用 NNRTIs 后产生耐药性的患者体内分离 HIV-1 活病毒, 通过 RT-PCR 扩增逆转录酶基因序列后利用分子克隆技术引入假病毒颗粒的 HIV-1 核心基因中, 建立含耐药突变位点的假病毒模型。由于该研究方法需要获取耐药性患者的血液并在 P3 实验室操作，因此使 HIV-1 的研究受到了限制。相关研究在国内未见报道。在本研究中，参考临床统计的最常出现的 9 种 NNRTIs 耐药病毒株 (图 1，表 1)，作者通过分子生物学方法在 HIV-1 核心基因中引入相应的耐药突变位点，建立了 9 种细胞水平的耐药型 HIV-1 重组假病毒药理筛选模型，并用非核苷类抑制剂 (奈韦拉平和依法韦伦) 和核苷类抑制剂 (齐多夫定和司他夫定) 对该模型进行了验证。本研究的整个实验操作均是在普通实验室进行的。