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1　前言

近几十年来,国内外对蜂王浆、蜂花粉、蜂毒、蜂王幼虫等蜂产品的抗癌作用都有较多的研究[1]。在蜂王幼虫方面,意大利等国学者研究发现,口服或注射蜂王幼虫浆,能使艾氏腹水癌小鼠寿命延长,腹水出现推迟,癌细胞发育有退行性改变。姚慈幼(1962)报道了蜂王幼虫浆可抑制腹水瘤生长,试验组比对照组平均寿命延长了6·6天,腹水量仅为对照组的1/16~1/14。

丁恬等研究发现,蜂王幼虫对S180肿瘤的抑制率为29·7%,对腹水瘤HEPA的生命延长率为83·33%。

但对工蜂幼虫和蛹的研究尚未见报道。为研究工蜂幼虫和蛹的药理作用,为开发工蜂虫蛹提供依据,我们就工蜂幼虫、蛹对小鼠S180肿瘤生长的抑制作用进行了研究,并与蜂王幼虫作了对比。

2　材料与方法

2·1　材料

2·1·1　蜜蜂虫蛹:工蜂幼虫、蛹分别为8~9日龄和18~19日龄,蜂王幼虫为生产蜂王浆时的副产品,6日龄;均取自浙江农业大学实验蜂场的意蜂蜂群。将幼虫和蛹在研钵中磨成匀浆,用蒸馏水配制成100mg/ml的浓度后备用。

2·1·2　实验动物:健康雄性ICR小鼠,体重20~22g,由浙江中医学院实验动物中心提供。

2·1·3　S180瘤株:由浙江中医学院提供。

2·2　方法

2·2·1　试验步骤:以传代10天的S180实体瘤小鼠为瘤源动物,颈椎脱臼,在无菌操作下取瘤块,剪成小块,用玻璃组织匀浆器研磨。磨匀后放入无菌容器内,加生理盐水适量稀释成1∶3 ~ 4的瘤细胞悬液。以0·2ml/只的数量分别接种于小鼠右前肢腋窝皮下(实体型)和腹腔内(腹水型)。接种后次日将小鼠随机分组,实体型与腹水型均分为工蜂幼虫组、工蜂蛹组、蜂王幼虫组和对照组4个组,并开始分别用工蜂幼虫、工蜂蛹、蜂王幼虫匀浆对各试验组小鼠灌胃(ig),每天1次,每只小鼠每天的剂量为20mg/20g;对照组用等量的蒸馏水灌胃(ig)。两组给药的时间均为10天,试验结束后分别计算出抑瘤率和生命延长率。

2·2·2　抑瘤率测定:接种后第10天处死实体型小鼠,取出皮下瘤块称重,计算抑瘤率。

抑瘤率=对照组平均瘤重-实验组平均瘤重对照组平均瘤重×100%

2·2·3　生命延长率测定:记录各组腹水瘤小鼠的生存时间(天数),于接种后的第45天处死存活小鼠,计算生命延长率。

生命延长率=实验组平均生存天数-对照组平均生存天数对照组平均生存天数×100%

3　结果

3·1　抑瘤率　实体型试验各组的瘤重明显低于对照组,差异极显著。工蜂幼虫、蛹、蜂王幼虫组的抑瘤率分别为60·92%、64·37%和59·77%,试验组各组间差异不显著(见表1)。

3·2　生命延长率　腹水型试验各组的生存期明显高于对照组,差异极显著。工蜂幼虫、蛹、蜂王幼虫组的生命延长率分别为80·65%、81·74%和79·03%,试验组各组间差异不显著(见表2)。

4　分析与讨论

4·1　动物移植性肿瘤试验是目前抗肿瘤药物研究中最常用的方法,比自发性及诱发性动物肿瘤试验更易实行,其结果可为抗癌药物临床疗效提供有意义的根据。

4·2　本研究结果表明:工蜂幼虫、蛹与蜂王幼虫一样,对S180实体型肿瘤的抑制作用十分明显,并能显著延长S180腹水癌荷瘤小鼠的存活期,其抑瘤率和生命延长率均高于中药疗效评价中规定的指标(抑瘤率为30%以上,生命延长率为50%以上)。因此,工蜂幼虫、蛹与蜂王幼虫同样具有很高的药用开发价值。

4·3　关于蜜蜂虫蛹的抗肿瘤机理,国内外多数学者认为可能与其中的激素有关。Burdeel曾报道,脱皮激素的粗制品能抑制培养中的哺乳动物肿瘤细胞的生长。但其作用机理到底如何,有待进一步研究。