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[摘要] 目的:通过参加湖南省2006年疾控机构卫生微生物实验室间比对试验结果,及时发现问题,纠正错误,不断提高实验室处理各种样品的能力和水平。方法:2006年湖南省疾控系统实验室间盲样比对检测。结果:根据湖南省CDC反馈信息,本中心考核成绩为满意。结论:从比对试验结果显示,本中心的总体检测能力和水平有明显提高。
[关键词] 质量控制;卫生微生物检验;比对试验
实验室检验是卫生监督、卫生防病工作的技术支撑,是开展卫生行政执法、疾病预防控制工作的重要基础和手段。开展实验室质量控制,参与实验室间比对和能力验证活动,接受盲样的分离鉴定工作能不断提高实验室处理各种样品的能力和水平。因而,我们每年都要定期参加湖南省CDC的质控考核。现将2006年的实验室间的质控考核情况及检验结果报告如下:
1 材料与方法
1·1 材料
1·1·1 质控样品 湖南省CDC下发的冻干盲样菌种两份。编号1号、2号。
1·1·2 培养基 本次质控所用培养基由北京陆桥商检新技术公司,杭州天和微生物试剂有限公司提供。细菌生化鉴定系统由杭州天和微生物试剂有限公司提供。在有效期内使用。
1·1·3 诊断血清 致病性大肠埃希菌诊断血清及O157:H7诊断血清由兰州生物制品研究所生产,在有效期内使用。
1·2 方法食品卫生微生物学检验GB/T4789·1~4789·31-2003[1]。
2 实验室检验
2·1 增菌无菌操作开启真空冻干菌种管,加无菌生理盐水0·5 ml溶解,接种增菌和分离培养的同时,增加1支营养肉汤作复苏(增菌)培养, 4~6 h转种增菌液及分离平板,培养18~24 h再分离1次。观察各增菌液生长情况:
增菌培养基名称培养温度时间生长情况1号菌2号菌GN增菌液37℃6~8 h培养澄清澄清TTB 42℃18~24 h培养均匀浑浊澄清7·5% NaCl肉汤37℃18~24 h培养澄清浑浊营养肉汤37℃6 h复苏(增菌)浑浊浑浊乳糖发酵管37℃18~24 h培养 +
2·1·1 各取一环样液直接接种到SS、WS、EMB、血琼脂平板(购买)、普通营养琼脂平板、乳糖发酵管, 37℃24 h培养。
2·1·2 取生长情况浑浊的TTB、营养肉汤液各1环,分别接种于SS、WS、EMB平板, 37℃24 h培养。另取生长情况浑浊的7·5% NaCl肉汤,营养肉汤各1环,分别接种到普通营养琼脂平板、血琼脂平板, 37℃24 h培养,观察各平板上的菌落特征。
2·2 分离培养情况
2·2·1 直接分离 1号菌:乳糖发酵产酸产气,在WS、SS平板上形成中等大小、圆形不透明的粉红色菌落,在EMB平板上见深紫色有金属光泽的菌落。2号菌:乳糖发酵产酸不产气,在普通琼脂平板上见浅黄色菌落,在血琼脂平板上见浅黄色菌落,无溶血环(购买血琼脂平板)。
在WS、SS、EMB平板上挑取可疑菌落涂片镜检:可见革兰阴性杆菌,无芽胞,来源于1号样。在血琼脂平板,普通营养琼脂平板上挑取黄色菌落涂片镜检:可见革兰阳性球菌,呈葡萄状,来源于2号样。
2·2·2 增菌后分离培养情况 WS、SS见粉红色菌落,不透明,中等大小。EMB平板上见深紫色有金属光泽菌落,菌落涂片镜检:革兰阴性杆菌,无芽胞。均来源于1号样。血琼脂平板(自制兔血)见浅金黄色菌落,有溶血环,普通营养琼脂平板也见浅黄色菌落,菌落涂片镜检:革兰阳性球菌,呈葡萄状。均来源于2号样。
2·2·3 其他增菌液中都不生长(澄清) 接种WS、SS平板、EMB、血琼脂平板、普通营养琼脂平板都不生长。
2·2·4 1号、2号原样经肉汤复苏(增菌) 再增菌、再分离培养。生长的菌落特征与上述结果相一致。
2·3 生化试验在分离培养生长为1号样菌落的平板上挑取5个以上的可疑菌落(G-杆菌)接种KI琼脂斜面, 37℃24 h培养,生长情况见表1,KI反应结果符合大肠埃希菌特征。
3 讨论
卫生微生物检验质量控制直接关系到细菌学检测结果的准确性和可靠性,是卫生检验工作中不可缺少的一部分。随着全球经济一体化进程日益加快,社会主义市场经济体制不断完善,传统的实验室管理模式也在发生根本性改变,正面临市场经济严峻挑战。特别是委托人(客户)有自主选择可信赖的有资质的实验室检验检测,促使实验室必须转变观念,坚持科学发展观,顺应市场经济潮流,以市场为导向,以客户服务为中心,以质量为生存,以技术为依托,强化"让客户满意是我们不懈的追求"的现代服务理念,严格地规范检验检测行为,不断地提高检验人员检测技术水平,确保提供委托人(客户)的检验结果准确、公正、科学。
对检测工作来说,实验室之间比对和能力验证是最基本最有效消除偏差,达到质控目的的手段,对检测结果起到复核和证明作用,通过能力验证,使我们对检测结果心中有底,及时发现问题,纠正错误,从而保证出具的检验数据满足质量要求。因此疾病预防控制机构实验室应积极参加上级卫生部门组织的能力验证和实验室间比对活动,从而找出差距,总结经验,有利于提高实验室的检测水平[2]。参加实验室间比对试验,并做好这项工作,实验室内部质量控制是前提,二者既相互影响,又相互促进。我们检验工作者要把室内质量控制工作具体落实到日常工作中,认真做好每一个环节。例如做试验要严格遵守微生物检验操作规程,配制培养基时要严格按照配方要求制备,做好配制记录,试剂要在有效期内使用,同时培养基、试剂以及诊断血清等定期用标准菌株进行质量监控。只有做好室内质量控制工作,才能增加室间质控考核结果的正确性和可靠性。
[参考文献]
[1]中华人民共和国国家标准·食品卫生检验方法微生物部分[M]·北京:中国标准出版社, 2003·
[2]王陇德·实验室建设与管理[M]·北京:人民卫生出版社,2005·260-265·
