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摘要:观察了东方田鼠封闭群在不同年龄阶段各种病理学变化的特征,为建立东方田鼠相关标准创造 条件。采用常规病理学技术,结合电镜方法,对不同年龄的46只封闭繁育的东方田鼠进行了研究和观 察。结果封闭群东方田鼠的病理变化主要集中在肺脏与肝脏;个别东方田鼠有乳腺癌和隐睾,东方田鼠 乳腺癌的电镜特征与昆明小鼠有所不同;封闭繁育的东方田鼠主要病变有8种;不同年龄的东方田鼠病 变的发生率亦不相同。因此,封闭群东方田鼠应加强病理监测,根据病理监测结果,有目的地分离病原 生物体。

关键词:东方田鼠;病理学;实验动物

Abstract:Bio-pathological changes in captive-bredMicrotusfortis( as a laboratory animal) were observed. Forty-six M.fortiswere divided into 3 different age groups and examined using standard pathological investigation techniques combined with electron-microscopy. Results showed pathological changes were found mainly in the liver and lung and were closely related to aging. Eight types of pathological change were found including individual cases of breast carci- noma and cryptorechism. The electron-microscopic characteristics of breast carcinoma inM.fortiswere different from those in KMmice. Therefore, before establishingM.fortisas a standardized laboratory animal, it is necessary to carry out pathological monitoring to and screen out potential pathologens.

Key words:Microtusfortis; Pathology; Laboratory animal

东方田鼠(Microtusfortis)主要分布在我国以及与我 国接壤的俄罗斯、朝鲜、蒙古的部分地区。我国的东方 田鼠分为5个亚种[1,2],即指名亚种(M.f.fortis)、长江 亚种(M.f.calamorum)、辽宁亚种(M.f.dolichoceph- alus)、黑龙江亚种(M.f.pelliceus)和福建亚种(M.f.fu- jianensis)。东方田鼠是我国农作区的害鼠,又是某些人 兽共患病的自然疫源性疾病的传播者,国内外学者对 其生态学、行为学等进行了许多研究[3~6]。此外,我国 学者早在50年代就观察到东方田鼠具有对日本血吸虫 的天然抗感染性[7],近年从遗传学、免疫学等角度对这 一特性也进行了研究,结果进一步证实,不论是东方田 鼠长江亚种,还是其它亚种,对日本血吸虫均有天然抗 性[8,9]。

为控制日本血吸虫流行,研制高效疫苗,作者进行 了东方田鼠实验动物化工作及生理学数据的测 定[10~12],对东方田鼠封闭群的病理学特征进行了研究, 现报道如下。

1　材料与方法

1.1　封闭群东方田鼠繁殖和建立　1994年,中国科学 院长沙农业现代化研究所研究人员从湖南省洞庭湖 区,捕获了40余对野生东方田鼠(长江亚种),饲养在该 所的动物室内,经过几年的驯化,东方田鼠已能进行稳 定的繁殖。1998年12月中南大学湘雅医学院实验动物 学部从该所引进20对东方田鼠,饲养在40 cm×28 cm ×15 cm的塑料大鼠笼内。笼内除用锯木屑作垫料外, 再加少许干稻草和少许硬木块(以利于动物磨牙);光 照周期为12 h明亮、12 h黑暗;室温长期保持为23℃; 饮水供应充足;饲料中粗蛋白22%、粗脂肪3·19%、粗 纤维8·41%。按随机交配法,对东方田鼠进行随机交 配,保证其近交系数每代上升不超过1%,连续繁殖4 代以上。

1.2　病理标本的收集

1.2.1　病理标本的收集方法　按群体大小的10%左 右抽样进行病理学检查,共采集东方田鼠46只,其中老 年组(15个月以上)20只,成年组(8个月)6只,未成年 组(1个月内)20只,各组动物均为雌雄各半。同时,收 集饲养在本单位昆明小鼠中的自发性乳腺癌小鼠,与 东方田鼠自发性乳腺癌作对照。

1.2.2　病理解剖与切片的制备　将东方田鼠无痛处死 后,用手术器械将皮肤剥离,检查各部位皮下组织,记 录病变情况;小心剪开头盖骨,暴露大脑、小脑,观察 大、小脑的形状,沿脑中线将脑剖开成二半,检查脑内 是否有病变,并切取小块脑组织,置于10%福尔马林固 定液中;随后剪开气管、食道,记录是否出血、充血等, 打开胸腔和腹腔,观察心脏、肺脏、胸腺、隔膜、肝脏、脾 脏、肾脏、肠系膜淋巴结、大肠、小肠、睾丸、卵巢、膀胱 等脏器,观察这些脏器的自然位置、色泽、大小,是否有 粘连等,并取少许置10%福尔马林固定液中固定。将 固定的各脏器组织,按常规进行石腊切片,H.E染色。

1.3　材料的制备与观察

1.3.1　透射电镜样品制备和观察　取少许东方田鼠自 发性乳腺癌与移灶肺癌组织,按常规透射电镜制样技 术制作超薄切片,在日立H600透射电镜下观察、拍照。

1.3.2　扫描电镜标本的制备与观察　按常规技术制 片,1%锇酸固定30 min,洗去锇酸,经梯度乙醇脱水,真 空喷镀,在JSM-5600LV扫描电镜下进行观察、拍照。

2　结　果

2.1　大体病理变化和病理组织学变化　封闭群东方田 鼠未出现明显的四肢和皮下损伤,老年组动物出现脑 萎缩,各组中肺、肝均有慢性病变,有个别雌性东方田 鼠有乳腺癌发生并有转移灶出现,发现一只雄性动物 有隐睾,对大多数动物均较难用肉眼观察到明显的病 理变化;通过病理组织学观察,可以看到间质性肺炎和 间质性肝炎,其特征为:肺间质水肿,并有纤维母细胞 增生,在有些个体中,可以看到肺泡腔内炎性渗出物, 发生机化,甚至有弥漫性间质纤维化;肝脏则在镜下能 见间叶细胞及纤维母细胞增生,个别有炎性细胞浸润; 此外,在有些东方田鼠肝细胞内可清晰看见脂肪空泡; 在发生水变性的肝细胞,细胞体积增大,胞浆基质内水 分含量增多,较为透明、淡染。

2.2　各年龄段病理变化发生率　老龄组动物各种病理 变化数量最多,20只动物中,11只个体有各种病理变 化,占55%,病变种类有8种,其中有些动物存在有两 种以上的病理变化。其它年龄段也有类似的情况,各 年龄段东方田鼠出现明显病理变化的发生率为:6只成 年组中的2只有明显病理组织学变化,占33%,病变的 种类有2种。20只未成年组中,有病变的有9只,占 45%,病变的种类有2种(表1)。

2.3　乳腺癌的病理变化特点及电镜观察结果　镜下正 常乳腺结构破坏,由大小不等的癌细胞浸润,有的中心 有坏死,癌细胞呈椭圆形,大小不一,染色质深浅不一, 核分裂相多见,间质中有较多的结缔组织,可见片状坏 死。组织形态多样,透射电镜可见胞浆内有大量颗粒 状结构物;扫描电镜观察,可见癌细胞表面有大量的微 绒毛状结构;与之对照的昆明小鼠乳腺癌细胞表面与 之完全不同,只有少量微绒毛状结构(图1,2)。