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对象与方法

一、对象

40例AL为我院及西安市儿童医院血液科住院患儿，根据临床表现，血象，骨髓象和细胞化学染色而确诊。其中男24例，女16例，最大年龄13岁，最小年龄1.4岁，平均年龄7.2岁。按FAB分型标准，急性淋巴细胞白血病(AL))22例(Lln例，L:8例，L33例)，急性非琳巴细胞白血病(ANLL)18例(M15例，M:3例，M:1例，M‘5例，M54例)。20例正常人为健康查体儿童，平均年龄6.8岁。

二、方法

1.标本收集:剔除AL患儿合并有严重感染或肝、肾功能损害等因素后，从晨起空腹被试者的肘、颈静脉抽血3ml，放入预冷并加有一Aprotinin500KIU的试管中，4℃离心，200or/min15min，分离血清，一40，C保存待测。联合化疗2一4个疗程(每疗程7天)后，以同样方法收集第2份标本。

2.血清TNF一a活性检测:用放射免疫方法测定，TNF一a放射免疫药合由解放军总医院东亚免疫研究所提供，均严格按说明书测定，复管、试剂盒技术指标符合质控标准。

3.临床治疗方法:ALL用COP、COAP或CODP方案，ANLL用HOAP、ADE或HAD方案。其它综合治疗方法及近期疗效评定标准参照全国儿童白血病诊疗常规。

4.统计方法:应用计算机软件Systat进行统计学分析。结果用x士S表示。

结果

一、AL患儿治疗前后血清TNF一a活性.结果:AL患儿治疗前TNF一a活性水平升高，治疗后显著降低，但仍高于正常对照组(P<0.01)见表1。

二、不同类型AL患儿血清TNF一a活性结果:ALIJ与ANLL之间在化疗前后血清TNF一a活性均有显著性差异见表2。ANLL患儿血清TNF一a高于ALL。

此外，1例ALL患儿合并脑膜白血病时，脑脊液(CSF)中TNF一a活性为l。ging/ml，治疗后CSF检验恢复正常，白血病细胞消失，CSF中TNF一a活性降为0.38ng/ml。

三、近期疗效与血清TNF一a活性的关系:化疗后获部份缓解(PR)的患儿，血清TNF一a活性水平显著高于获完全缓解(CR)者，即使获CR的患儿血清TNF一a活性水平仍高于正常对照组。提示血清TNF一a活性水平与临床疗效之间呈负相关性见表3。

肿瘤坏死因子(TNF)是由单核—巨噬细胞产生的单核细胞刺激因子(Monokine)，在炎症，免疫反应中起重要作用，与肿瘤及白血病的发生、发展密切相关。近年来研究表明，白血病细胞亦可通过自分泌，或通过刺激其它细胞产生(旁分泌)TNF一a‘3’，某些外源性刺激物或细胞因子亦可影响白血病细胞产生TNF一a的能力。因此，许多学者用不同方法测定不同类型白血病患者血中TNF一a浓度，并发现有重要的临床意义。但国内报道少见。本文采用放射免疫方法对不同类型的急性白血病(AL)患儿化疗前后测定外周血中TNF一a浓度，动态观察该因子在化疗过程中的变化。结果显示，不同类型AL患儿在诊断时血清TNF一a活性显著升高，化疗后随着病情好转，骨髓缓解而逐渐降低，若TNF一a活性显著升高或居高不降者，则提示病情恶化或对化疗方案无效，与Foa等报道一致。Ullam等‘5，研究认为，AL获CR后血清TNF一a活性降到正常人范围，但本研究结果仍高于正常对照组(P<o·01一0.05)。我们认为，即使已获得CR的AL患儿，体内白血病细胞绝对值仍约106个，这些细胞通过自分泌或旁分泌等途径产生TNF一a，使其活性高于正常人范围，有待进一步研究。以上结果表明AL患儿血清TNF一a活性水平高低，与临床病情重、轻，及骨髓白血病细胞多少呈平行关系。

不同类型AL患儿TNF一a活性不一致，本组ANLL患儿无论化疗前后血清TNF一a浓度都高于ALL患儿。证明不同类型白血病细胞产生TNF一a的能力不同。结合临床，小儿ALL对化疗反应好，易获得CR，且持续CR时间及无病生存期均较ANLL长。提示，检测AL患儿血清TNF一a活性水平可以协助判断AL类型及预后。

尽管有研究认为，在AL时血清TNF一a活性水平与外周血白细胞总数，患者年龄，有无发热及感染无相关性。但本组资料在收集标本时，尽可能排除感染，发热及其它影响因素。故可以认为此结果反映了AL患儿实际血清TNF一a浓度。

本组仅1例ALL患儿合并脑膜白血病，鞘内化疗前后CSF中TNF一a含量相差5倍，CSF中白血病细胞数与TNF一a含量成正比。提示测定CSF中TNF一a活性可以辅助小儿AL中枢神经系统受累的早期诊断及疗效判断。

本研究提示，定期检测AL患儿血清TNF一a浓度可以作为判断AL疗效及预后的临床指标。